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我來(lái)告訴你卵清蛋白ELISA的提取操作是怎樣的

更新時(shí)間:2021-03-08  |  點(diǎn)擊率:646
   卵清蛋白ELISA又稱白蛋白,是一種含有微量磷的糖蛋白,是一種高質(zhì)量的蛋白質(zhì),占總蛋白的54-69%,是一種典型的球蛋白。不會(huì)被5%飽和硫酸銨溶液沉淀。在動(dòng)物組織、體液和某些植物種子中。分子量低,易溶于水。
  卵清蛋白ELISA是動(dòng)物卵中的一種儲(chǔ)存蛋白,它為胚胎發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)氨基酸。某些植物種子的貯藏蛋白是種子萌發(fā)的來(lái)源,也是食品中蛋白質(zhì)的重要來(lái)源。
  提取操作步驟:
  1,取新鮮雞蛋兩只,得蛋清50ml,置于燒杯中放置在25-30的水中,不斷攪拌條件下,緩慢加入等體積得-丙酮(1:2V/V),立即出現(xiàn)大量白色絮狀沉淀,加完后終PH約3.5,繼續(xù)攪拌30min,然后在4冰箱中放置過(guò)夜。
  2,次日用漏斗抽濾,得黃綠色清液。
  3,邊攪拌邊加入4預(yù)冷的丙酮200ml沉淀卵清蛋白ELISA,在4放置2h之后將上清液小心倒入瓶中回收,下部沉淀部分于4000rpm離心5min,收集沉淀。
  4,將沉淀溶于10ml無(wú)離子水中,對(duì)無(wú)離子水(50倍)透析4h,換水兩次,再對(duì)碳酸鈉緩沖液透析過(guò)夜,4000rpm離心10min,去除不溶物。
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